Согласно определению Всемирной Организации Здравоохранения, к внезапной смерти относят случаи гибели практически здоровых лиц или больных, состояние которых считалось вполне удовлетворительным. Очевидно, что большинство людей имеет те или иные отклонения в состоянии здоровья, которые не оказывают существенного влияния на повседневную жизнь и не снижают её качества. Другими словами, патологические изменения со стороны органов и систем, если у таких людей и существуют, то носят стойко компенсированный характер. Таких представителей человечества относят к категории «практически здоровых». Именно в этой группе и встречается чаще всего феномен, который ученые назвали внезапной смертью. В этом словосочетании удивительно не второе слово (все люди рано или поздно умирают), а первое. Внезапная - это неожиданная смерть, которая наступает без всякого предупреждения, среди полного благополучия. Эта катастрофа не поддаётся до настоящего времени никакому прогнозированию. Она не имеет предвестников и признаков, которые могли бы насторожить врачей. Изучая многочисленные, всё более часто встречающиеся, случаи внезапной смерти, специалисты пришли к выводу, что это событие всегда имеет сосудистые причины, что и позволяет относить его к сосудистым катастрофам.
Крупный бизнесмен с типичной грузинской фамилией, из числа наследников богатства развалившегося Советского Союза, все тяготы раздела имущества уже перенёс и жил в Лондоне здоровой и правильной жизнью. Ему наверняка хватало денег на полноценное медицинское обследование, а личные врачи не пропустили бы даже подозрительного шума в области сердца. Смерть наступила внезапно и совершенно неожиданно. Ему было немного за 50. Вскрытие тела причин смерти не обнаружило.
Точной статистики внезапной смерти нет, поскольку не существует общепринятого определения этого понятия. Однако подсчитано, что в США каждые 60-75 секунд 1 человек умирает от неожиданной остановки сердца. Проблема внезапной сердечной смерти, привлекавшая внимание кардиологов в течение многих десятилетий, вновь остро встала в последние годы, когда проведённые Всемирной Организацией Здравоохранения широкие популяционные исследования продемонстрировали возрастающую частоту внезапной смерти среди взрослого, и не только взрослого, населения. Оказалось, что случаи внезапной смерти встречаются не так уж редко, и проблема эта требует пристального изучения.
При патологоанатомическом обследовании (вскрытии) умерших, как правило, не удаётся обнаружить признаков повреждения сердца или сосудов, которые могли бы объяснить внезапную остановку кровообращения. Другая особенность внезапной смерти заключается в том, что в случае оказания своевременной помощи таких больных можно оживить, и на практике это происходит довольно часто. Обычно оживление (реанимация) выполняется посредством искусственного дыхания и закрытого массажа сердца. Иногда для восстановления кровообращения бывает достаточно удара кулаком в грудь – в область сердца. Если катастрофа наступает в лечебном учреждении или в присутствии врачей службы «скорой помощи», то для восстановления кровообращения используется высоковольтный разряд электрического тока – дефибрилляция.
Внезапную смерть, в основе которой лежат патологические изменения со стороны сердца, принято называть внезапной сердечной смертью. Сердечные причины составляют основную массу случаев внезапной смерти. Основанием для такого суждения служат статистические данные, свидетельствующие о том, что патологические изменения сердца отмечаются, даже если пострадавший никогда не жаловался на состояние своего здоровья. Атеросклероз коронарных артерий можно обнаружить более чем у половины умерших в результате внезапной остановки кровообращения людей. Рубцы на сердечной мышце, которые свидетельствуют о перенесённом ранее инфаркте, и увеличение массы сердца обнаруживаются в 40-70% наблюдений. Такие очевидные причины, как свежие тромбы в коронарных артериях при внезапной сердечной смерти удаётся найти крайне редко. При внимательном исследовании (понятно, что все случаи внезапной смерти служат основанием именно для внимательного исследования) какую-нибудь патологию обнаружить удаётся почти всегда. Однако это не делает внезапную смерть менее загадочной. Ведь все изменения со стороны сердца и сосудов существуют и формируются длительное время, а смерть наступает внезапно и совершенно неожиданно. Новейшие методы исследования сердечно-сосудистой системы (ультразвуковое сканирование, спиральная компьютерная томография) обнаруживают самые мелкие изменения сосудов и сердца без всякого вскрытия тела. И эти данные показывают, что те или иные изменения можно обнаружить практически у всех людей, которые, к счастью, в большинстве своём благополучно доживают до старости.
Поскольку в случаях внезапной смерти никаких разрушений сердечно-сосудистой системы обнаружить не удаётся, остаётся предполагать, что эта катастрофа связана с нарушением функции, а не с изменением структуры сердца. Это предположение получило подтверждение с развитием и внедрением в клиническую практику методов длительного наблюдения за работой сердца (регистрация ЭКГ в течение часов и суток). Стало ясно, что внезапная смерть чаще всего (65-80%) непосредственно связана с фибрилляцией желудочков.
Фибрилляция желудочков – очень частое (до 200 и более в 1 минуту), беспорядочное сокращение желудочков сердца – трепетание. Трепетание не сопровождается эффективными сокращениями сердца, поэтому последнее перестает выполнять свою основную, насосную, функцию. Прекращается циркуляция крови, наступает смерть. Внезапная желудочковая тахикардия – учащение сокращений желудочков сердца до 120–150 ударов в минуту – резко увеличивает нагрузку на миокард, быстро истощает его резервы, что приводит к остановке кровообращения.
Вот как выглядит на электрокардиограмме срыв нормального ритма в состояние трепетания желудочков:
Как правило, за трепетанием следует полная остановка сердца вследствие истощения его энергетических резервов. Но фибрилляцию нельзя считать причиной внезапной смерти, это, скорее, – её механизм.
Принято считать, что наиболее важным причинным фактором внезапной сердечной смерти служит остро возникшая ишемия миокарда – нарушение кровоснабжения мышцы сердца, обусловленное спазмом или закупоркой коронарных артерий. Именно так: принято считать, потому что ничего другого в голову не приходит, когда специалисты рассматривают сердце как орган, потребляющий кровь подобно двигателю, потребляющему горючее. Действительно, кислородный голод приводит к нарушениям способности сердечной мышцы сокращаться, увеличивает чувствительность к раздражению, что способствует нарушениям ритма. Установлено, что нарушения нервной регуляции работы сердца (дисбаланс вегетативного тонуса) могут привести к срыву ритма. Точно известно, что возникновению аритмии способствует стресс - гормоны изменяют возбудимость сердечной мышцы. Известно также, что недостаток калия и магния оказывает существенное влияние на работу сердца и при определённых условиях может привести к его остановке. Нет никаких сомнений, что некоторые лекарственные вещества, токсические факторы (например, алкоголь) могут привести к повреждениям проводящей системы сердца или способствовать нарушениям сократительной способности миокарда. Но, при всей ясности отдельных механизмов нарушений нормальной работы сердца, множество случаев внезапной смерти не получают удовлетворительного объяснения. Вспомним хотя бы регулярно повторяющиеся случаи смерти молодых спортсменов.
24-летний французский теннисист Матье Монкур, который в ночь на вторник 7 июля 2008 года был найден мёртвым в своей квартире в пригороде Парижа, скончался от остановки сердца.
Как правило, в этой группе тренированных, отлично развитых физически молодых людей достаточно хорошо поставлено медицинское наблюдение. Маловероятно, что среди профессиональных спортсменов, сумевших добиться незаурядных успехов своими физическими усилиями, встречаются люди, страдающие серьёзными заболеваниями сердца и сосудов. Ещё труднее представить себе коронарную недостаточность у людей, регулярно переносящих огромные физические нагрузки. Относительно высокую статистику внезапной смерти среди спортсменов можно объяснить лишь явными перегрузками или применением фармакологических средств, увеличивающих физическую выносливость (допинг). По статистике, у молодых людей внезапная смерть чаще всего связана с занятиями спортом (около 20%) или возникает во время сна (30%). Высокая частота остановки сердца во время сна убедительно опровергает коронарную природу внезапной смерти. Если не во всех случаях, то – в значительной их части. Во время сна наступают физиологические изменения ритма, которые характеризуются брадикардией - снижением частоты сердечных сокращений до 55-60 ударов в минуту. У тренированных спортсменов эта частота ещё ниже.
В.Турчинский - выдающийся спортсмен и просто красивый человек, пропагандирующий и ведущий здоровый образ жизни, внезапно падает и умирает не дожив до 50 лет.
Нескольких газетных строк удостаиваются внезапно умершие известные спортсмены, политики, артисты. Но множество подобных катастроф происходит и с обычными людьми, о которых не пишут в газетах.
- Он ведь был совершенно здоров! – изумляются несколько дней потрясённые родственники и знакомые. Но неумолимая убедительность произошедшего вскоре заставляет поверить фактам: если умер, значит, был болен.
Внезапная смерть достоверно чаще настигает еще одну категорию больных – лиц, страдающих психическими заболеваниями. Исследователи связывают этот феномен с употреблением психотропных препаратов, большинство из которых оказывают влияние на проводящую систему сердца.
Известно, что внезапной смерти подвержены алкоголики. Здесь все более или менее ясно: этиловый спирт разрушает миокард и проводящую систему сердца. Однажды, лишённое энергии и ритмического управления, сердце просто останавливается после очередного запоя.
Казалось бы, теперь круг пострадавших определён: группу риска составляют люди с заболеваниями сердца, не проявляющими себя до определённого времени, спортсмены, для которых физические перегрузки являются частью образа жизни, многочисленные представители популяции, злоупотребляющие алкоголем или лекарствами.
Но в этом ряду особняком стоят случаи смерти маленьких детей – синдром внезапной младенческой смертности. Британские ученые, изучившие 325 таких случаев, пришли к выводу, что чаще всего опасность наступает на 13-ой неделе жизни. Почти всегда смерть младенца наступает во сне; чаще это происходит в холодное время года и когда малыш лежит на животе. Некоторые исследователи связывают внезапную смерть младенцев с запахами (парфюмерия, табачный дым).
При всей ясности связи факторов риска и трагических случаев внезапной смерти, основная часть внезапно умерших людей этих факторов не имела никогда. Внезапная смерть повадилась посещать вполне здоровых людей.
Со времен появления человека его всегда мучили вопросы таинства рождения и смерти. Жить вечно невозможно, да и, наверное, еще не скоро ученые изобретут эликсир бессмертия. Каждого волнует вопрос о том, что чувствует человек, когда умирает. Что происходит в этот момент? Эти вопросы волновали людей всегда, и до сих пор ученые так и не нашли ответа на них.
Трактовка смерти
Смерть является естественным процессом завершения нашего существования. Без нее невозможно представить себе эволюцию живого на земле. Что происходит, когда человек умирает? Такой вопрос интересовал и будет интересовать человечество, пока оно существует.
Уход из жизни в какой-то степени доказывает, что выживает сильнейший и наиболее приспособленный. Без него невозможен был бы биологический прогресс, и человек, может быть, никогда не появился бы.
Несмотря на то что этот закономерный процесс всегда интересовал людей, говорить о смерти тяжело и трудно. Прежде всего потому, что встает психологическая проблема. Разговаривая о ней, мы как бы мысленно приближаемся к концу своей жизни, поэтому так не хочется говорить о смерти в любом контексте.
С другой стороны, говорить о кончине трудно, потому что мы, живые, ее не переживали, поэтому не можем сказать, что чувствует человек, когда умирает.
Некоторые сравнивают смерть с обычным засыпанием, а другие утверждают, что это своего рода забывание, когда человек напрочь забывает обо всем. Но ни одни, ни другие, естественно, не правы. Эти аналогии нельзя назвать адекватными. Можно только утверждать, что смерть - это исчезновение нашего сознания.
Многие продолжают верить, что после своей смерти человек переходит просто в другой мир, где существует не на уровне физического тела, а на уровне души.
Можно с уверенностью сказать, что исследования смерти будут продолжаться всегда, но они так и не дадут окончательного ответа о чувствах людей в этот момент. Это просто невозможно, с того света еще никто не возвращался, чтобы нам поведать, как и что там происходит.
Что чувствует человек, когда умирает
Физические ощущения, наверное, в этот момент зависят от того, что привело к смерти. Поэтому они могут быть болезненными или нет, а некоторые считают, что и вполне приятными.
Внутренние ощущения у каждого перед лицом смерти свои. У большинства людей существует какой-то страх, сидящий внутри, они как бы сопротивляются и не хотят ее принимать, всеми силами цепляясь за жизнь.
Научные данные свидетельствуют, что после того, как сердечная мышца останавливается, мозг еще в течение нескольких секунд живет, человек уже ничего не чувствует, но еще в сознании. Некоторые считают, что именно в это время происходит подведение жизненных итогов.
Ответить на вопрос о том, как умирает человек, что при этом происходит, никто, к сожалению, не может. Все эти ощущения, скорее всего, строго индивидуальны.
Биологическая классификация смерти
Так как само понятие смерти - это биологический термин, то и к классификации необходимо подходить с этой точки зрения. Исходя из этого, можно выделить следующие категории смерти:
- Естественная.
- Неестественная.
К естественной можно отнести физиологическую кончину, которая может наступить из-за:
- Старения организма.
- Недоразвития плода. Поэтому он погибает практически сразу после рождения или еще в утробе матери.
Неестественная смерть подразделяется на следующие виды:
- Смерть от болезни (инфекции, сердечно-сосудистые заболевания).
- Внезапная.
- Скоропостижная.
- Смерть от внешних факторов (механические повреждения, нарушение дыхания, от воздействия электрического тока или низких температур, врачебное вмешательство).
Вот так примерно можно дать характеристику смерти с биологической точки зрения.
Социально-правовая классификация
Если о смерти говорить в этом ракурсе, то она может быть:
- Насильственная (убийство, самоубийство).
- Ненасильственная (эпидемии, несчастный случай на производстве, профессиональные болезни).
Насильственная смерть всегда связана с воздействием извне, в то время как ненасильственная обусловлена старческой дряблостью, заболеваниями или физическими недостатками.
При любом виде смерти повреждения или болезни запускают патологические процессы, которые и являются непосредственно причиной ухода из жизни.
Даже если известна причина смерти, все равно невозможно сказать, что видит человек, когда умирает. Этот вопрос так и останется без ответа.
Признаки смерти
Можно выделить первоначальные и достоверные признаки, которые свидетельствуют о том, что человек умер. К первой группе относятся:
- Тело находится без движения.
- Бледная кожа.
- Сознание отсутствует.
- Дыхание остановилось, пульса нет.
- Отсутствует реакция на внешние раздражители.
- Зрачки не реагируют на свет.
- Тело становится холодным.
Признаки, которые говорят о 100%-м наступлении смерти:
- Труп окоченевший и холодный, начинают появляться трупные пятна.
- Поздние трупные проявления: разложение, мумификация.
Первые признаки можно несведущему человеку перепутать с потерей сознания, поэтому констатировать смерть должен только врач.
Этапы смерти
Уход из жизни может занимать разные периоды времени. Это может длиться минуты, а в некоторых случаях часы или дни. Умирание - это динамический процесс, при нем смерть наступает не сразу, а постепенно, если не иметь в виду мгновенную кончину.
Можно выделить следующие стадии умирания:
- Преагональное состояние. Нарушаются процессы кровообращения и дыхания, это приводит к тому, что тканям начинает не хватать кислорода. Такое состояние может продолжаться как несколько часов, так и несколько дней.
- Терминальная пауза. Останавливается дыхание, нарушается работа сердечной мышцы, прекращается деятельность мозга. Этот период длится всего несколько минут.
- Агония. Организм резко начинает борьбу за выживание. В это время происходят короткие остановки дыхания, ослабление сердечной деятельности, в результате все системы органов не могут осуществлять свою работу нормально. Изменяется внешний вид человека: западают глаза, нос становится острым, нижняя челюсть начинает отвисать.
- Клиническая смерть. Прекращается дыхание и кровообращение. В этот период человека еще можно оживить, если прошло не более 5-6 минут. Именно после возвращения к жизни на этой стадии многие люди рассказывают, что происходит, когда человек умирает.
- Биологическая смерть. Организм окончательно прекращает свое существование.
После смерти многие органы еще несколько часов сохраняют свою жизнеспособность. Это очень важно, и именно в этот период их можно использовать для пересадки другому человеку.
Клиническая смерть
Ее можно назвать переходным этапом между окончательной гибелью организма и жизнью. Сердце прекращает свою работу, дыхание останавливается, исчезают все признаки жизнедеятельности организма.
В течение 5-6 минут в головном мозге еще не успевают запуститься необратимые процессы, поэтому в это время есть все шансы вернуть человека к жизни. Адекватные реанимационные действия заставят сердце вновь биться, органы функционировать.
Признаки клинической смерти
Если внимательно наблюдать за человеком, то достаточно легко можно определить наступление клинической смерти. У нее следующие признаки:
- Пульс отсутствует.
- Дыхание прекращается.
- Сердце перестает работать.
- Сильно расширенные зрачки.
- Отсутствуют рефлексы.
- Человек находится без сознания.
- Кожа бледная.
- Тело занимает неестественное положение.
Чтобы определить наступление этого момента, необходимо прощупать пульс и посмотреть зрачки. Клиническая смерть отличается от биологической тем, что зрачки сохраняют способность реагировать на свет.
Пульс можно прощупать на сонной артерии. Обычно это делают одновременно с проверкой зрачков, чтобы ускорить диагностирование клинической смерти.
Если человеку не оказать помощь в этот период, то наступит биологическая смерть, и тогда вернуть его к жизни уже будет невозможно.
Как распознать приближающуюся смерть
Многие философы и врачи сравнивают процесс рождения и смерти между собой. Они всегда индивидуальны. Невозможно с точностью предсказать, когда человек покинет это мир и как это произойдет. Однако большинство умирающих испытывают похожие симптомы в момент приближения смерти. На то, как умирает человек, даже могут не влиять причины, спровоцировавшие начало этого процесса.
Перед самой кончиной происходят в организме определенные психологические и физические изменения. Среди наиболее ярких и часто встречающихся можно отметить следующие:
- Энергии остается все меньше и меньше, часто посещает сонливость и слабость во всем теле.
- Меняется частота и глубина дыхания. Периоды остановки сменяются частыми и глубокими вдохами.
- Происходят изменения в органах чувств, человек может слышать или видеть то, чего не слышно остальным.
- Аппетит становится слабым или практически исчезает.
- Изменения в системах органов приводят к появлению слишком темной мочи и труднопроходимого стула.
- Наблюдаются скачки температуры. Высокая может резко сменяться низкой.
- Человек полностью теряет интерес к внешнему миру.
Когда человек серьезно болен, то перед смертью могут наблюдаться и другие симптомы.
Чувства человека в момент утопления
Если задавать вопрос о том, что чувствует человек, когда умирает, то ответ может зависеть от причины и обстоятельств смерти. У каждого это происходит по-своему, но в любом случае в этот момент ощущается острый дефицит кислорода в головном мозге.
После того как движение крови приостановлено, независимо от способа, примерно через 10 секунд человек теряет сознание, а немного позже наступает гибель организма.
Если причиной смерти становится утопление, то в момент, когда человек оказывается под водой, у него начинается паника. Так как без дыхания обойтись невозможно, то через некоторое время утопающему приходится сделать вдох, но вместо воздуха в легкие поступает вода.
По мере заполнения водой легких в груди появляется чувство жжения и распирания. Постепенно, через несколько минут, появляется спокойствие, которое говорит о том, что сознание скоро покинет человека, и это приведет к смерти.
Продолжительность жизни человека в воде будет также зависеть и от ее температуры. Чем она холоднее, тем быстрее наступает переохлаждение организма. Даже если человек находится на плаву, а не под водой, шансы на выживание уменьшаются с каждой минутой.
Уже бездыханное тело еще можно достать из воды и вернуть к жизни, если прошло не очень много времени. Первым делом надо освободить дыхательные пути от воды, а затем в полной мере провести реанимационные мероприятия.
Чувства в момент сердечного приступа
В некоторых случаях бывает так, что резко человек упал и умер. Чаще всего смерть от сердечного приступа наступает не внезапно, а развитие недуга происходит постепенно. Инфаркт миокарда сражает человека не сразу, в течение некоторого времени люди могут чувствовать определенный дискомфорт в груди, но стараются не обращать на это внимания. В этом и состоит большая ошибка, которая заканчивается смертью.
Если вы склонны к сердечным приступам, то не стоит ожидать, что все само собой пройдет. Такая надежда может стоить вам жизни. После остановки сердца пройдет всего несколько секунд до того момента, пока человек потеряет сознание. Еще несколько минут, и смерть уже забирает у нас близкого.
Если пациент находится в больнице, то у него есть шанс выкарабкаться, если врачи вовремя обнаружат остановку сердца и проведут реанимационные мероприятия.
Температура тела и смерть
Многих интересует вопрос о том, при какой температуре человек умирает. Большинство еще со школьной скамьи из уроков биологии помнят, что для человека температура тела выше 42 градусов считается смертельной.
Некоторые ученые связывают смертельный исход при высокой температуре со свойствами воды, молекулы которой изменяют свою структуру. Но это только догадки и предположения, с которыми науке еще предстоит разбираться.
Если рассматривать вопрос о том, при какой температуре человек умирает, когда начинается переохлаждение организма, то можно сказать, что уже при остывании тела до 30 градусов человек теряет сознание. Если в этот момент не принять никаких мер, то наступит смерть.
Много таких случаев происходит с людьми в алкогольном опьянении, которые засыпают в зимнее время прямо на улице и уже больше не просыпаются.
Эмоциональные изменения накануне смерти
Обычно перед кончиной человек становится совсем безучастным ко всему происходящему вокруг. Он перестает ориентироваться во времени и датах, становится молчаливым, но некоторые, наоборот, начинают постоянно говорить о предстоящей дороге.
Близкий умирающий человек может начать вам рассказывать, что разговаривал или видел умерших родственников. Другим крайним проявлением в это время является состояние психоза. Близким всегда тяжело все это переносить, поэтому можно обратиться к врачу и посоветоваться насчет приема лекарственных препаратов, чтобы облегчить состояние умирающего.
Если человек впадает в состояние оцепенения или часто и подолгу спит, не старайтесь его растормошить, разбудить, просто будьте рядом, держите за руку, разговаривайте. Многие даже в состоянии комы все прекрасно слышат.
Смерть - это всегда тяжело, каждый из нас переступит в свое время через эту грань между жизнью и небытием. Когда это произойдет и при каких обстоятельствах, что вы будете при этом чувствовать, к сожалению, предсказать невозможно. У всех это сугубо индивидуальные ощущения.
Жизнь и смерть замечательного российского актера Юрия Демича относятся к давним советским и постсоветским временам. Он родился спустя три года после окончания Великой Отечественной войны и основной пик его творчества пришелся на 70-80-е годы, когда интерес и уважение публики к актерскому мастерству были вполне заслуженными и естественными. Причина смерти Юрия Демича - несовместимая с жизнью кровопотеря.
Кинозрителям Юрий Демич известен по многим ролям в кино, но его восхитительное театральное творчество смогли по достоинству оценить только любители театра северной столицы, имевшие возможность посещать Ленинградский Большой драматический театр. Он был актером от Бога - талантливым, фантастически трудоспособным, разносторонним и уникальным.
Свою профессию Демич выбрал по примеру отца, который стал жертвой сталинских репрессий и провел 20 лет в магаданской ссылке, где и родился Демич-младший. По примеру отца, свободно делавшего в 60-летнем возрасте сальто-мортале, молодой актер увлекся спортом и долгое время держал себя в отличной физической форме.
Он с детства начал выходить на сцену еще с отцовской труппой Куйбышевского театра драмы им. М. Горького, окончил студию при нем, а потом поступил в ГИТИС. В 1973 г. роль Гамлета, мастерски сыгранная в Куйбышеве, стала для Демича путевкой на сцену Ленинградского Большого драматического театра. Он покорил и публику, и коллег, и режиссера А. Г. Товстоногова, возглавлявшего коллектив, своей игрой в спектаклях «Прошлым летом в Чулимске» по пьесе Вампилова и «Три мешка сорной пшеницы» самого мэтра.
Став одним из ведущих актеров этого театра, Демич блестяще сыграл за 7 театральных сезонов около 40 ролей и каждый раз, выходя на сцену, был готов играть как впервые. В кино ему тоже часто предлагали большие роли, а всего их за 20 лет было без малого 50. Такая мощная трата энергии, несмотря на избыток здоровья, темперамента и сил, могла оказаться губительной. Актер начал понемногу выпивать и однажды попался под горячую руку Товстоногова - непримиримого противника пьянства на сцене.
Был ли Демич на самом деле виноват, как донесли режиссеру, известно немногим, но из родного театра ему пришлось уйти. Эта трагедия далась актеру нелегко: переехав в столицу и устроившись в труппу Московского Ермоловского театра, он начал терять контроль над своей слабостью. Его театральный репертуар сократился, хотя в кино его по-прежнему приглашали. Но он запил уже открыто.
Когда Юрий Александрович, взяв себя в руки, стал налаживать трезвую жизнь, в стране начинались проблемы экономического характера и ему оказалось трудно найти работу. Демич подрабатывал поездками по России с выступлениями.
Кочевая жизнь окончательно подорвала его здоровье. В декабре 1990 года у актера началось сильное кровотечение, которое медики не смогли остановить. Причиной смерти Юрия Демича в возрасте 42 лет стал разрыв вен пищевода, приведший к огромной кровопотере.
Он похоронен на Ваганьковском кладбище Москвы.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ СТАТЬИ
УДК 577.15:576.367
Акадезин вызывает неапоптотическую гибель опухолевых клеток
В. А. Глазунова1*, К. В. Лобанов2, Р. С. Шакулов2, А. С. Миронов2, А. А. Штиль1 "Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина РАМН, 115478, Москва, Каширское ш., 24
■Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов, 117545, Москва, Дорожный пр-д, 1 *E-mail: [email protected] Поступила в редакцию 27.12.2012
РЕФЕРАТ Изучено действие акадезина (5-аминоимидазол-4-карбоксамид-1-0-О-рибофуранозид) на опухолевые и неопухолевые клетки различного видового и тканевого происхождения. Установлено, что акадезин вызывает неапоптотическую гибель опухолевых клеток; чувствительность неопухолевых клеток к действию этого соединения существенно ниже. Акадезин вызывает гибель опухолевых клеток с фенотипом лекарственной устойчивости, обусловленной экспрессией транспортера Р-гликопротеина и инактивацией проапоптотического белка р53. Необходимым условием гибели клеток является активность транспортеров аденозина, тогда как функция АМР-активируемой протеинкиназы не требуется. Преимущественная гибель опухолевых клеток под действием акадезина и особенности механизма его цитотоксичности обусловливают перспективность этого соединения в качестве противоопухолевого средства. ключевые слова акадезин, гибель клеток, опухолевые клетки.
введение
Акадезин (5-аминоимидазол-4-карбоксамид-1-Р-О-рибофуранозид, АИКАР) проходит клинические испытания в качестве препарата для лечения хронического лимфоцитарного лейкоза . Важное свойство акадезина - его преимущественная токсичность для опухолевых клеток при менее выраженном повреждении неопухолевых . Ранее показали, что акадезин способен стимулировать АМР-активируемую протеинкиназу (АМРК) -важный регулятор энергетического баланса клетки, контролирующий окисление жирных кислот, метаболизм глюкозы, синтез белков, жирных кислот и холестерина . Механизм действия акадезина обусловлен его фосфорилированием аденозинкиназой с образованием ZMP (5-амино-4-имидазолкарбоксамидриботида) - промежуточного продукта de novo-синтеза пуриновых оснований . ZMP, имитируя метаболические эффекты АМР, способен активировать АМРК. Противоопухолевое действие акадезина связывают с индукцией апоптоза . Вместе с тем имеются данные о неапоп-тотической гибели клеток и АМРК-независимом механизме действия акадезина на опухолевые клетки .
В настоящей работе изучено действие акадезина на клетки млекопитающих. Показано, что акадезин вызывает гибель опухолевых клеток различного тка-
невого происхождения, в том числе клеток, устойчивых к ряду противоопухолевых средств. Механизмы гибели клеток отличаются от апоптоза; их важной особенностью оказывается необходимость транспорта аденозина. Неопухолевые клетки менее чувствительны к действию акадезина. Избирательность ци-тотоксического действия и особенности механизмов гибели опухолевых клеток могут быть важными факторами, определяющими перспективность использования акадезина в терапии опухолей.
экспериментальная ЧАСТЬ
В экспериментах использовали следующие линии клеток человека: НСТ116 (аденокарцинома толстой кишки), НСТ116р53КО (изогенная сублиния, в которой не функционирует р53), К562 (промиелоцитар-ный лейкоз), К562/4 (сублиния, полученная после селекции на выживание в присутствии доксорубицина; экспрессирован белок множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) P-гликопротеин; Pgp), MCF-7 (аденокарцинома молочной железы), MCF-7Dox (сублиния после селекции на выживание в присутствии доксорубицина; фенотип Pgp-опосредованной МЛУ), культуру фибробластов ПФЧ-2, лимфоциты крови здоровых доноров, а также клетки мыши: Р388 (лимфоцитарный лейкоз) и Sp2/0 (миелома). Реактивы приобретены в фирме «ПанЭко», Россия (кроме особо оговоренных случаев). Клетки культивировали в мо-
дифицированной Дульбекко среде Игла с добавлением 5% эмбриональной телячьей сыворотки (Bio-Whittaker, Австрия), 2 мМ L-глутамина, 100 ЕД/мл пенициллина и 100 мкг/мл стрептомицина при 37°С, 5% СО2 в увлажненной атмосфере. В экспериментах использовали культуры в логарифмической фазе роста. Лимфоциты выделяли из периферической крови доноров центрифугированием в градиенте плотности фиколла-урографина (d = 1.077 г/см3).
Акадезин получали в ГосНИИГенетика микробиологическим способом с использованием оригинального рекомбинантного штамма . Кроме того, оценивали цитотоксичность акадезина фирмы Sigma. В этой же фирме приобретены дипиридамол - ингибитор рецепторов аденозина , 5-йодтубер-цидин - ингибитор аденозинкиназы, препятствующий превращению акадезина в ZMP, и zVAD-fmk (карбобензоксивалилаланил-аспартил--фторметилкетон) - пан-каспазный ингибитор. Все соединения растворяли в диметилсульфоксиде или воде (10-20 мМ) и хранили при -20°С. В день опыта готовили разведения препарата в культуральной среде. Для оценки цитотоксичности акаде-зина использовали МТТ-тест, окраску клеток йодидом пропидия и аннексином V, конъюгированным с флуоресцеинизотиоцианатом (ФИТЦ), определение
клеточного цикла в проточной цитофлуориметрии и электрофоретический анализ целостности геномной ДHK . В отдельных опытах препаратом сравнения служил алкильный катионный глицеро-липид гас-П-{4-[(2-этокси-3-октадецилокси)проп-1-илоксикарбонил]бутил}-№-метилимидазолийиодид, индуктор апоптоза .
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Преимущественная чувствительность опухолевых клеток к акадезину
В предварительных экспериментах мы установили, что препарат акадезина, полученный микробиологическим способом, и коммерческий акадезин идентичны по физико-химическим свойствам, чистоте, стабильности при хранении и цитотоксичности (данные не приведены). Для дальнейших исследований использовали акадезин, полученный авторским способом. В табл. 1 представлена цитотоксичность акадезина для трансформированных и нетрансфор-мированных клеток (культивируемых или свежевыделенных) различного видового и тканевого происхождения.
Из данных, представленных в табл. 1, следует, что к действию акадезина наиболее чувствительны
Таблица 1. Цитотоксичность акадезина для клеток млекопитающих
^етки Акадезин, мМ
G G.125 G.25 G.5 1.G 2.G
K562 1GG* 1GG 70 46 9 G
P388 1GG 36 30 20 9 G
Sp2/0 1GG 34 29 14 G G
K562/4 1GG 1GG 72 42 8 G
MCF-7 1GG 1GG 82 50 15 2
MCF-7Dox 1GG 1GG 86 48 17 1
HCT116 1GG 1GG 50 36 23 G
HCT116p53KO 1GG 1GG 54 34 25 G
ПФЧ-2, пролиферирующие 1GG 1GG 1GG 96 96 86
ПФЧ-2, непролиферирующие** 1GG 1GG 1GG 1GG 95 92
Донорские лимфоциты 1GG 1GG 1GG 98 94 90
Примечание. Представлены результаты MTT-теста после 72-часовой инкубации клеток. "Выживаемость клеток, инкубированных без акадезина, принимали за 100%. Каждое значение - среднее пяти независимых опытов, стандартное отклонение < 0%. ""Пролиферацию фибробластов останавливали культивированием клеток до монослоя (контактное торможение деления клеток).
клетки Р388 (лейкоз мыши) и Sp2/0 (миелома мыши): при концентрации акадезина, равной 0.125 мМ, выживает ~1/3 клеточной популяции. Другие исследованные линии трансформированных клеток также гибнут под действием субмиллимолярных концентраций акадезина. Важно, что цитотоксичность акадези-на практически одинакова в случае лейкозной линии К562 и ее сублинии с Pgp-опосредованной МЛУ (К562/4). То же верно для линии аденокарциномы молочной железы MCF-7 и сублинии с МЛУ (табл. 1). Сравнение цитотоксичности акадезина в отношении линии НСТ116 и сублинии НСТ116р53КО (устойчивой к ряду ДНК-повреждающих противоопухолевых соединений) показало, что инактивация проапоп-тотического белка р53 не приводит к увеличению выживания клеток в присутствии акадезина.
Столь же важна существенно более высокая выживаемость неопухолевых клеток в присутствии акадезина: гибель донорских лимфоцитов и нетранс-формированных фибробластов практически отсутствовала даже при действии акадезина в миллимо-лярных концентрациях в течение 72 ч непрерывного воздействия (табл. 1). Таким образом, акадезин вызывает преимущественную гибель трансформированных клеток (суспензионных и эпителиальных), в том числе сублиний, устойчивых к другим противоопухолевым соединениям. Неопухолевые клетки повреждаются акадезином в значительно меньшей степени. Эти особенности обусловливают перспективность использования акадезина в качестве противоопухолевого средства. Однако для этого важно установление механизмов токсичности акадезина для опухолевых клеток.
Акадезин вызывает неапоптотическую гибель клеток
Влияние акадезина на распределение плоидно-сти клеток линии аденокарциномы толстой кишки НСТ116 изучено методом проточной цитофлуориме-трии. Через 24 ч после внесения акадезина (0.25 мМ) определяли накопление клеток в фазе S, а через 48 ч (рис. 1) - массовую гибель клеток (область слева от пика G1; гиподиплоидные ядра).
Накопление фрагментированной ДНК может быть признаком апоптотической гибели клеток, если расщепление ДНК происходит в межнуклеосомных промежутках, что видно по образованию набора фрагментов длиной 140-170 п.н. при электрофорезе. Для проверки этой возможности определяли целостность ДНК в клетках НСТ116, обработанных акадези-ном. Оказалось, что акадезин, в отличие от препарата сравнения - алкильного катионного глицеролипида , не приводит к появлению характерной для апоп-тоза «лестницы» фрагментов ДНК (рис. 2).
Флуоресценция
Рис. 1. Распределение клеток линии НСТ116 по фазам цикла при действии 0.4 мМ акадезина. А - интактные клетки; В - накопление в фазе S через 24 ч; В - накопление в области суб^1 через 48 ч
Аргументом в пользу неапоптотического механизма гибели клеток НСТ116 при действии акаде-зина служат результаты окрашивания клеток ан-нексином У-ФИТЦ и йодидом пропидия (рис. 3). Аннексин У связывает фосфатидилсерин на плазматической мембране (транслокация фосфатидил-серина из внутреннего липидного слоя мембраны
Рис. 2. Целостность ДНК в клетках линии НСТ116.
1 - Интактные клетки;
2 - акадезин, 0.4 мМ, 24 ч;
3 - алкильный катионный глицеролипид, 6 мкМ, 24 ч (контроль метода)
Рис. 3. Окраска клеток линии НСТ116 аннексином V-ФИТЦ и йодидом пропидия. Псевдоцвета: красный -интактные клетки; фиолетовый - акадезин (0.4 мМ, 24 ч); синий - алкильный катионный глицеролипид (контроль метода; см. подпись к рис. 2)
в наружный считается признаком апоптоза). Йодид пропидия способен проникать в клетки, подвергающиеся некрозу (нарушение целостности плазматической мембраны). Клетки линии НСТ116, обработанные акадезином (0.4 мМ, 24 ч), не окрашивались аннексином V-ФИТЦ; напротив, клетки накапливали йодид пропидия (рис. 3), что позволяет предположить некротический компонент механизма гибели. Сходные результаты получены при регистрации некротических клеток с помощью трипанового синего (данные не представлены). Вероятно, нарушение целостности плазматической мембраны - позднее событие при индуцированной акадезином гибели клеток. Препарат сравнения - алкильный катионный глицеролипид - вызывал характерное для апопто-за увеличение аннексин V-положительных клеток (рис. 3).
Поскольку апоптотическая гибель клеток предполагает активную роль каспаз, изучено действие пан-каспазного ингибитора zVAD-fmk на цитотоксичность акадезина. Клетки линии НСТ116 инкубировали с 200 мкМ zVAD-fmk в течение 30 мин, после чего в культуры вносили акадезин и продолжали инкубацию в течение 24 ч. Присутствие zVAD-fmk не снизило гибель клеток, что подтверждает заключение о неапоптоти-ческом механизме цитотоксичности акадезина.
Взаимодействие с рецепторами аденозина необходимо для гибели опухолевых клеток под действием акадезина
Перенос акадезина из внеклеточной среды в клетки может осуществляться транспортерами аденозина . Мы изучили эффект дипиридамола - ингибитора этих транспортеров, на цитотоксичность акаде-зина в линии клеток Р388. Оказалось, что в присутствии дипиридамола клетки нечувствительны даже к относительно высоким (до 0.8 мМ) концентрациям акадезина (табл. 2).
Для выяснения роли метаболического пути акадезин^МР-АМРК в цитотоксичности акадезина
Таблица 2. Цитотоксичность акадезина в комбинациях с дипиридамолом или 5-йодтуберцидином
Воздействие Акадезин, мМ
0 0.08 0.1 0.2 0.4 0.8
Акадезин 100* 79 З8 ЗЗ 20 18
Акадезин + дипиридамол, 5 мкМ 100 100 99 99 100 101
Акадезин + 5-йодтуберцидин, 0.05 мкМ 100 76 З9 З1 22 16
*Выживаемость (%) клеток лейкоза Р388 по данным МТТ-теста после инкубации в течение 72 ч.
(его фосфорилирование аденозинкиназой с образованием ZMP и активации AMPK) клетки инкубировали с акадезином и ингибитором аденозинкиназы 5-йодтуберцидином. Ингибитор не влиял на цитотоксичность акадезина (табл. 2). Из этого следует, что гибель клеток в ответ на акадезин не обусловлена образованием ZMP и активацией AMPK.
Таким образом, изучение механизмов цитотоксичности акадезина выявило ряд особенностей, указывающих на нетривиальный характер фармакологических эффектов этого соединения. Акадезин вызывает гибель культивируемых опухолевых клеток при существенно менее выраженном действии на неопухолевые. Акадезин токсичен для клеток с молекулярными детерминантами лекарственной устойчивости - экспрессией Pgp и нефункционирующим р53. Важно подчеркнуть неапоптотический характер гибели опухолевых клеток под действием акадезина. Эти результаты позволяют расценивать акадезин как своеобразный реагент для изучения механизмов гибели опухолевых клеток и перспективный кандидат в лекарственные средства.
Открытым остается вопрос о внутриклеточной мишени акадезина, взаимодействие с которой обусловливает гибель опухолевых клеток. Мы показали, что условием гибели клеток является функционирование транспортеров аденозина, тогда как активация АМРК не требуется. Правомерно предположить, что опухоли, экспрессирующие указанные транспортеры и рецепторы аденозина, будут наиболее чувствительны к акадезину. Роль транспорта пуриновых оснований в гибели клеток изучена недостаточно; требуется анализ дифференциальной экспрессии переносчиков и рецепторов аденозина в опухолях разного типа. Вероятно, повышенная экспрессия этих молекул окажется новым молекулярным маркером чувствительности опухолей к акадезину и критерием отбора больных для соответствующей терапии.
Работа поддержана Министерством образования и науки Российской Федерации (Государственный контракт № 16.N08.12.1010), а также частично поддержана Фондом некоммерческих программ «Династия».
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Acadesine. AICA Riboside, ARA 100, Arasine, GP 1 110.
Drugs R D. 2008. V. 9. № 3. P. 169-175.
2. Jose C., Bellance N., Chatelain E.H., Benard G., Nouette-Gau-lain K., Rossignol R. // Mitochondrion. 2012. V. 12. P. 100-109.
3. Jose C., Hebert-Chatelain E., Bellance N., Larendra A., Su M., Nouette-Gaulain K., Rossignol R. // Biochim. Biophys. Acta. 2011. V. 1807. P. 707-718.
4. van den Neste E., van den Berghe G., Bontemps F. // Expert Opin. Invest. Drugs. 2010. V. 19. № 4. P. 571-578.
5. Javaux F., Vincent M.F., Wagner D.R., van den Berghe G. // Biochem. J. 1995. V. 305. P. 913-919.
6. Merrill G.F., Kurth E.J., Hardie D.G., Winder W.W. // Endocrinol. Metab. 1997. V. 273. № 6. P. 1107-1112.
7. Su R.Y., Chao Y., Chen T.Y., Huang D.Y., Lin W.W. // Mol. Cancer Therapy. 2007. V. 6. № 5. P. 1562-1571.
8. Theodoropoulou S., Kolovou P.E., Morizane Y., Kayama M., Nicolaou F., Miller J.W., Gragoudas E., Ksander B.R., Vavvas D.G. // FASEB. 2010. V. 24. P. 2620-2630.
9. The Handbook of Metabolomics. Methods in Pharmacology and Toxicology / Eds Whei-Mei Fan T. et al. 2012. V. 17. P. 439-480.
10. Walker J., Jijon H.B., Diaz H., Salehi P., Churchill T., Madsen K.L. // Biochem. J. 2005. V. 385. P. 485-491.
11. Campas C., Santidrian A.F., Domingo A., Gil J. // Leukemia. 2005. V. 19. P. 292-294.
12. Lopez J.M., Santidrian A.F., Campas C., Gil J. // Biochem. J. 2003. V. 70. P. 1027-1032.
13. Guigas B., Sakamoto K., Taleux N., Reyna S.M., Musi N., Viollet B., Hue L. // IUBMB Life. 2009. V. 61. № 1. P. 18-26.
14. Лобанов К.В., Эрраис Лопес Л., Королькова Н.В., Тяглов Б.В., Глазунов А.В., Шакулов Р.С., Миронов А.С. // Acta Naturae. 2011. T. 3. № 2 (9). С. 83-93.
15. Lysenkova L.N., Turchin K.F., Korolev A.M., Bykov E.E., Da-nilenko V.N., Bekker O.B., Trenin A.S., Elizarov S.M., Dezhen-kova L.G., Shtil A.A., Preobrazhenskaya M.N. // J. Antibiotics. (Tokyo). 2012. V. 65. № 8. P. 405-411.
16. Симонова В.С., Самусенко А.В., Филиппова Н.А., Тевяшо-ва А.Н., Лынив Л.С., Кулик Г.И., Чехун В.Ф., Штиль А.А. // Бюлл. эксп. биол. мед. 2005. Т. 4. С. 451-455.
17. Маркова А.А., Плявник Н.В., Плетнева М.В., Серебренникова Г.А., Штиль А.А. // Клин. онкогематол. 2012. Т. 5. № 2.
18. Shchekotikhin A.E., Glazunova V.A., Dezhenkova L.G., Shevtsova E.K., Traven’ V.F., Balzarini J., Huang H.-S., Shtil A.A., Preobrazhenskaya M.N. // Eur. J. Med. Chem. 2011. V. 46. P. 213-218.
19. Gadalla A.E., Pearson T., Currie A.J., Dale N., Hawley S.A., Sheehan M., Hirst W., Michel A.D., Randall A., Hardie D.G., Frenguelli B.G. // J. Neurochem. 2004. V. 88. P. 1272-1282.
Советский летчик-истребитель Валентин Бондаренко мог бы стать первым человеком в космосе. Во всяком случае, шансы на это у него были… Но до своего первого полета он попросту не дожил: погиб по глупой случайности во время испытаний.
Первый отряд
Валентин Васильевич Бондаренко родился 16 февраля 1937 года в Харькове. Его отец, начальник цеха Харьковской меховой фабрики, в первые дни войны ушел на фронт. Вместе с матерью и старшим братом Валентин пережил немецкую оккупацию. Старшеклассником он стал заниматься в Харьковском аэроклубе. В 1954 году, после окончания школы, поступил в Ворошиловградское военно-авиационное училище, после его расформирования перевелся в Грозненское, а затем – в Армавирское училище, которое и окончил с отличием в 1957 году. Военную службу Бондаренко проходил в авиационных частях ВВС Прибалтийского военного округа.
28 апреля 1960 года сбылась заветная мечта Валентина: после тщательного отбора он был зачислен в первый отряд советских космонавтов. Из нескольких тысяч желающих отобрали всего 29 человек.
Первоначально Валентин не вошел в число шести кандидатов на космический полет на корабле «Восток». Но по разным причинам несколько отобранных будущих космонавтов выбыли из строя, и к тренировкам привлекли Бондаренко.
Нелепая смерть
В число испытаний входило десятисуточное пребывание в сурдобарокамере, целью которого было проверить реакцию на отсутствие внешних раздражителей. Считалось, что условия в камере приближены к условиям внутри космического аппарата. Располагалась она в НИИ-7 ВВС (ныне Институт авиационной и космической медицины).
По завершении эксперимента Валентину сообщили, что он может снять прикрепленные к телу медицинские датчики. В местах прикрепления остались красные следы, которые Бондаренко протер смоченным в спирте ватным тампоном. После этого молодой человек, не глядя, швырнул ватку в сторону мусорного ведра. Но по несчастливой случайности она угодила на спираль раскаленной электроплитки и тут же вспыхнула… Поскольку камера была наполнена почти чистым кислородом, пламя быстро распространилось. На Бондаренко загорелся шерстяной тренировочный костюм.
Открыть камеру быстро не удалось из-за большого перепада давления. Когда ее наконец открыли, курсант был еще жив. Врачи Боткинской больницы 8 часов боролись за его жизнь. Он скончался 23 марта 1961 года, всего за 19 дней до полета Гагарина, который вместе с товарищами по отряду несколько часов провел у него в больнице… Причиной смерти стал ожоговый шок.
Засекреченный герой
О гибели старшего лейтенанта Валентина Бондаренко нигде не сообщалось: в те времена все, что было связано с космосом, строго засекречивалось. Однако 17 июня 1961 года указом Президиума Верховного Совета СССР Бондаренко «за успешное выполнение задания правительства» был посмертно награжден орденом Красной Звезды.
На могиле Бондаренко, расположенной в Харькове на Филипповском кладбище, установили обелиск с надписью: «Светлой памяти от друзей-летчиков». Только в 80-е появилась приписка: «-космонавтов СССР».
Бондаренко оставил жену Анну и сына Александра. Какое-то время они продолжали жить в Звездном городке, где Анна работала в Центре подготовки космонавтов, потом уехали в Харьков, где у них была родня. Вплоть до достижения 16-летия Саше выплачивали за отца пенсию в 100 рублей - деньги по тем временам вполне приличные. Впоследствии Александр Бондаренко пошел по стопам отца и стал военным летчиком.
Только в 1980 году о гибели Валентина Бондаренко стала писать западная пресса. В СССР статья о нем впервые вышла в 1986 году в «Известиях». В 1991 году именем Бондаренко был назван один из лунных кратеров, а в июле 2013 года имя летчика-космонавта было присвоено школе № 93 города Харькова, где он когда-то учился.
Казалось бы, гибель Валентина Бондаренко не имеет никакого отношения к самим космическим полетам – это просто трагическая случайность. Однако без таких ошибок и трагедий космонавтика не могла бы развиваться. Кстати, эта история заставила инженеров и ученых пересмотреть конструкцию испытательной сурдобарокамеры, в частности, изменив состав и давление атмосферы, что было учтено и при дальнейшей разработке пилотируемых космических кораблей.
Сегодня в музее Первого полета, расположенном в городе Гагарин Смоленской области, на малой родине первого в мире человека, вышедшего в космос, можно увидеть сурдобарокамеру, являющуюся точной копией той, в которой погиб Валентин Бондаренко.
